Assassin’s Creed II jest owocem ponad dwuletniej pracy zespołu odpowiedzialnego za markę Assassin’s Creed. Assassin’s Creed II zachęca gracza do wcielenia się w Ezio – młodzieńca reprezentującego jedną z arystokratycznych włoskich rodzin okresu Renesansu. Ród głównego bohatera padł ofiarą walki o wpływy, toczonej między możnowładczymi rodzinami tamtego okresu. Ezio - przemierzając rozległy otwarty świat gry - poszukuje zemsty. Jego poczytania wplecione są w rozbudowaną fabułę i intrygę, dzięki czemu użytkownik może zaangażować się w rozmaite misje, zaskakujące zadania i korzystać z szerokiego wachlarza broni. W miarę toczącej się rozgrywki, również charakter głównej postaci będzie ewoluować, wciągając w świat Assassin’s Creed zarówno nowych użytkowników, jak i tych, którzy już znają markę.